Laboratórne práce. Stanovenie aktivity katalázy
(Podľa A.N. BAHU a A.I. OPARINA)
Všetky rôznorodé transformácie, ktoré tvoria základ života tela, sa vyskytujú za účasti biologických katalyzátorov - enzýmy, ktoré sú špecifickými proteínmi.
Vďaka enzýmom sa prejavuje jeden z nádherných vlastností živých buniek - schopnosť implementovať najkomplexnejšie reakcie vo veľmi krátkom čase a pri relatívne nízkej telesnej teplote. Biologický význam tohto fenoménu je veľmi veľký.
Ak chcete študovať pôsobenie enzýmov, je potrebné ich vyčleniť z nažive tkanív. Zvyčajne je zvolený ľahko prístupný zdroj bohatý na tento enzým. Aby bolo možné preložiť enzým do roztoku, je potrebné zničiť bunkové škrupiny, ktoré sa dosahujú s použitím homogenizátora, trením do malty s panvou, zmrazenie a rozmrazovanie, autolýzou atď. Zvyčajne sa vyrába zničenie bunkových škrupín Pri nízkych teplotách, spôsobe, ktorým sú všetky enzymatické procesy suspendované v tkanivách.
Skupina redox enzýmov obsahuje hem obsahujúci enzým katalázaktoré katalyzuje reakciu rozkladu peroxidu vodíka s uvoľňovaním molekulárneho kyslíka:
2N 2 O 2 - > 2 H20 + O 2
Catalase sa nachádza vo väčšine tkanín živého organizmu.
Princíp metódy.
Peroxid vodíka sa rozkladá katalázátou. Nadbytok peroxidu vodíka sa titruje manganistan draselný v kyslom prostredí. Reakcia je pod rovnicou:
2 KMNO 4 + 5 H202 + 3 H 2 SO 4 - > 2 MNSO 4 + K2S04 + 8 H20 + 5 O 2
V experimente sa určuje počet zostávajúcich nedeštruktívny peroxid vodíka, v kontrole - celkový počet peroxidov vodíka (kataláza v kontrolnej vzorke sa inaktivuje varu).
Zodpovedajte výsledky skúseností z výsledkov kontroly, naučte sa počet peroxidu vodíka zničil v určitom časovom období, čo umožňuje posúdiť aktivitu katalázy.
Vybavenie: 1. Prazem priamo o 50 a 100 ml (1 ks).
2. Cylinder na 10 ml
3. Malta s paličkami
4. Kužeľové banky pre 200-250 ml (2 ks).
5. Technické váhy s variáciami
6. Pipetujte na 10 ml "Enzým výfuku"
7. Pipeta "H 2 SO 4"
8. Vriac Vodný kúpeľ
9. Spachtľa
10. FAKAKA MERNOSŤ NA 100 ml
11. Voronek
12. Filtračný papier
Materiály: 1. Čerstvý rastlinný materiál (mrkva alebo zemiaky)
2. 0,1 H2O2 Riešenie
3. 0.1N Riešenie KMNO4
4. 10% roztok H 2 SO 4
5. SacO 3 (CRESTH)
6. Sand Quartz
Pokrok:
2 g surových zemiakov (alebo mrkva) sa trituruje s kremenným pieskom v malte, postupne pridávajú 2-3 ml vody. Na zníženie kyselinovej reakcie pridajte uhličitan vápenatý na zastavenie vylučovania bublín oxidu uhličitého. Hmota sa kvantitatívne prenesie do meracej banky a privedie sa do 100 ml vodou. Zmes sa nechá stáť 30-60 minút, po čom sa filtruje.
V kužeľovej banke na 200 ml sa 25 ml 0,1H roztoku peroxidu vodíka odobraje z burety a pridá sa pipeta 20 ml enzýmového výfuku. Po 30 minútach sa účinok enzýmu zastaví pridaním 5 ml 10% roztoku kyseliny sírovej a titruje zmes 0,1 H-roztoku manganistanu draselného (pred vytvorením rezistentného na približne 1 min ružového farbenia). Bol zaznamenaný počet mililitrov roztoku manganistanu draselného, \u200b\u200bktorý sa zaznamenal na titráciu zostávajúceho peroxidu vodíka.
Súčasne sú regulované inaktivovaným zahrievaním vo vriacom vodnom kúpeli počas 5 minút enzýmovým roztokom (20 ml) k tomuto roztoku po ochladení sa pridá 25 ml 0,1H roztoku peroxidu vodíka. Zmes sa nechá stáť 30 minút, potom sa pridá 5 ml 10% roztoku kyseliny sírovej a tithuje s 0,1 H roztokom manganistanu draselného. Počet mililitrov manganistante draslík, ktorý sa dostal do titulu celkovým množstvom peroxidu vodíka.
Z hľadiska rozdielu medzi experimentálnou a kontrolnou titráciou sa množstvo manganistanu považuje za ekvivalentné množstvu rozloženého peroxidu vodíka. Podľa reakčnej rovnice medzi KMNO 4 a H202, 1 ml 0,1 h trvalý roztok manganistanu draselného zodpovedá 1,7 mg peroxidu vodíka.
Príklad výpočtu.
Z 1,25 g mrkvy pripravil výfukový výfuk s kataľovou s objemom 100 ml. 15,5 ml testovanie sa vynaložilo na titráciu experimentálnej vzorky, kontrola-30,2 ml 0,1 h trvalý roztok manganistanu draselného. Množstvo rozloženého peroxidu vodíka vo vzorke je ekvivalentné 30,2-15,5 \u003d 14,7 ml 0,1 h trvalý roztok manganistanu draselného a teda 14,7 * 1,7 \u003d 24,99 mg.
V 1 g surovej mrkvy obsahuje množstvo katalázy, schopné rozkladu za 30 minút (24,99 * 100) / (20 x 1,25) \u003d 99,96 mg peroxidu vodíka a 1 minútu - 99,96 / 30 \u003d 3,33 mg. Ako
1 μmol peroxidu vodíka je 0,034 mg, potom 33,3 / 0,034 \u003d 100 e katalárov je prítomných v 1 g mrkvy.
Laboratórne pracovné číslo 4.
Príprava sviatosti z kvasinkových buniek. Špecifickosť pôsobenia enzýmov.
Všetky rôznorodé chemické transformácie, ktoré tvoria základ života tela, pokračujú v účasti biologických katalyzátorov - enzýmy, ktoré sú s N E C a F a H C a M a B E L K a M a.
Vďaka enzýmom sa prejavuje jedno z pozoruhodných vlastností živých buniek - schopnosť implementovať najkomplexnejšie reakcie vo veľmi krátkom čase a relatívne pri nízkej telesnej teplote.
Štúdium vlastností enzýmov, podmienky ich pôsobenia, stanovenie obsahu enzýmov v rôznych orgánoch a tkanivách má veľký význam pre správne pochopenie najkomplexnejších procesov života tela.
Jednou z najdôležitejších vlastností enzýmov je špecificita ich činnosti s ohľadom na konkrétny substrát. Špecifickosť katalytických vlastností enzýmov sa prejavuje v tom, že enzým, spravidla, pôsobí len na určitú látku. Na prísnej špecifickosti enzýmov ukazuje skutočnosť, že v prípadoch stereoizomérie určitý enzým katalyzuje len jedno štiepenie stereoizoméru. Špecifickosť enzýmov je ich základná biologická vlastnosť, bez ktorej je nariadený metabolizmus nemožný.
V tomto príspevku, spôsoby rozdelenia substrátom enzýmu saharázy - sacharózy a rozdelením škrobu enzýmom - amyláza, ktorý je obsiahnutý v ľudskom sline.
Extrakcia sviatosti z buniek kvasiniek
Materiály a reagencie:
· Lisované kvasinky - 10 g
· Homogenizátor (malta s paličkami)
· Quartz piesok
· Destilovaná voda
Pokrok
10 gramov suchých kvasiniek vložených do malty, pridajte 10 ml destilovanej vody a homogenizujte v porcelánovej malte s malým množstvom kremenného piesku na zničenie bunkových stien. Potom sa porcelánová malta s homogenizátom umiestni do sušiacej skrine s teplotou 60 0 spánku 30-40 minút.
Po uplynutí určeného času vyberte maltu, ochladzujte, pridajte 30 ml destilovanej vody a utrite obsah malty na homogénnu hmotu.
Potom homogenizát, na vyzrážanie bunkovej hmoty, centrifuguje pri 3000 ot / min počas 15 minút. Výsledný supernatant je extrakt z cukru.
Laboratórne práce
Stanovenie aktivity katalázy (1.11.1.6)
1) s výpočtom manganistanu draselného a kataláza(Bach a Zubkovská metóda)
Princíp metódy. Enzým kataláza je obsiahnutý vo veľkých množstvách v červených krvinkách, ako aj vo všetkých tkanivách a telesných tekutinách. Biologickou úlohou katalázy je neutralizovať peroxid vodíka (n2 o 2. ) Rozkladom na molekulárnom kyslíku a vode:
2N 2 O 2 → O 2 + 2N 2 O
Aktivita enzýmu je exprimovaná pomocou indikátora katalázy a katalázy.Číslo katalázu Nazývajú množstvo peroxidu vodíka, ktoré sa počas určitého časového obdobia rozdelí 1,0 μl krvi. Množstvo vyzrážaného peroxidu vodíka je posudzované rozdielom v počte manganistanu draselného, \u200b\u200bktorý šiel na titráciu kontrolných a prototypov.
Indikátor katalázu Vypočítajte pomer čísla katalázu na množstvo miliónov erytrocytov v 1,0 ul krvi pod štúdiom.
Reagencie: 1) 1% roztok H202; 2) 10% roztok kyseliny sírovej; 3) 0,1 M roztokom manganistanu draselného (pre titráciu).
Predmet štúdia: Hemolyzát získaný chovnou krvou destilovanej vody v pomere 1: 1000.
Varenie : 10 ml destilovanej vody sa naleje do rozmerovej banky na 100 ml a do mikropipety sa pridá 0,1 ml krvi. Pipeta sa niekoľkokrát premyje rovnaké riešenie. Voda sa pridá do banky na štítok a získa sa základný roztok krvi (1: 1000), ktorý sa používa na stanovenie čísla katalázy.
Pokroku.
V dvoch tetovacích bankách (skúsenosti a kontrole) nalial 7 ml vody a v každom pridaní 1 ml hlavného krvného roztoku. Každá banka sa vykoná presne 2 ml. K kontrolnej banke sa pridá 3 ml, aby sa oddelila kataláza. Obe banky sa inkubujú pri teplote miestnosti 30 minút. Potom sa do experimentálnej banky naleje 3 ml 10% roztoku sulfátovej kyseliny. Obsah oboch baniek sa titruje 0,1 M roztokom manganistanu draselného, \u200b\u200bkým sa objaví ružové farbenie. Viacnásobný rozdiel medzi výsledkami skúseností a kontroly podľa 1,7 a získajte kataláza počet krvi.
Príklad výpočtu : MOL ekvivalent n2 o 2. sa rovná 17 g. Takže v 1 ml 0,1 M roztoku obsahuje 1,7 mg2 o 2. ; \\ T Vynásobenie 1,7 rozdielu medzi množstvom ml 0,1 M roztoku manganistanu draselného, \u200b\u200bktorý sa dostal na titul obsahu kontrolnej a experimentálnej banky, prijímať číslo mg2 o 2. Ktoré rozdeľuje 1 ul krvi pod štúdiom, to znamená, že okamžite vypočítajú katalázu.
NORMY: kataláza sa pohybuje od 10 do 15 kusov,
Indikátor katalázu je 2-3x10 -: 6 , V klinike sa používa častejšie
Klinická a diagnostická hodnota.Vysoká aktivita katalázy sa pozorovalo pri zbytočnej a makrocytovej anémii, ako aj pri vstupe do alkoholu, kofeínu, acetónu telu na telo. Aktivita katalázy v krvi sa znižuje s rakovinou, anémiou, tuberkulózou a inými ochoreniami.
2) Použitím amóniového molybátu
Cataláza je jedným z najviac fylogeneticky starobylých enzýmov antioxidačného systému organizmu, označuje triedu oxidoordktáz, katalyzuje redox reakcií, je zahrnutá v skupine hydroperoxidázy s použitím substrátu2 O 2 (2 H202 → 2N 2 O + O 2 ) Alebo organické hydropercykly, teda spolu s katalázou, má peroxidázovú aktivitu. Podľa štruktúry - hemoproteín obsahujúci 4 lemové skupiny. Kataláza je intracelulárny enzým. V cirkulujúcej krvi je väčší podiel enzýmu lokalizovaný v cytoplazme erytrocytov.
Funkcie Catalase:
Zúčastňuje sa na ochrane tela od endogénneho peroxidu vodíka, ktorý je generovaný v dôsledku fungovania aeróbnych dehydrogenáz;
Potláča tvorbu hydroxylových radikálov;
Chráni pred oxidáciou hemoglobínu a prispieva k prenosu kyslíka vo vnútri bunkových štruktúr;
Podieľa sa na oxidačnom metabolizme niektorých aminokyselín;
Chráni pred oxidáciou SH-skupiny, vrátane tých, ktoré sú zahrnuté v aktívnom centre mnohých enzýmov a funkčne aktívnych proteínov.
Princíp metódy. Aktivita katalázy sa stanoví konverziou substrátového enzýmu (peroxid vodíka), ktorý je schopný tvorby maľovaného komplexu solybdančnými solými amónnymi.
Reagencie. 1) 0,03% roztok H202 ; \\ T 2) 4% roztok amónneho molybdátu.
Biologický materiál:krvné sérum.
Pokroku. Skúsená skúška: Do 2,0 ml 0,03% roztoku peroxidu vodíka pridá 0,1 ml séra. Vs testom Namiesto séra - 0,1 ml destilovanej vody.V kontrolná vzorka Namiesto peroxidu sa pridá 2,0 ml destilovanej vody. Vzorky inkubujú 10 minút pri 37 ° C° C, potom zastavte reakciu pridaním 1,0 ml 4% roztoku molybdénu amónneho.Centrifuge 10 min pri 4000 ot / min. Zmerajte optickú hustotu nečinných a prototypov proti kontrole pri vlnovej dĺžke 410 nm.
Platba Katalazová aktivita v sére:
A (MKAT / L) \u003d
kde e op a e - vyhynutie skúsených a nečinných vzoriek, \\ t
3.1 - Všeobecné chov,
T - Časová inkubačná, C,
V. - objem poškodenej vzorky, l,
22,210 3 - extinkčný koeficient, \\ tmmol -1 cm -1.
Katalánová aktivita v sére 2,6+ 0,5 μut / l
Registrácie práce.
Zaznamenajte zásadu metódy. Opravte výsledky, vytiahnite.
Princíp metódy:molybdén-oxid amónium s roztokom peroxidu vodíka tvorí komplexnú žltú zlúčeninu. Cataráza ničí peroxid vodíka podľa nasledujúceho vzorca:
2N 2 O 2 \u003d 2N 2 O + O 2
Stupeň poklesu intenzity farby roztoku je úmerný aktivite katalázy.
Pokrok:k experimentálnej a kontrolnej trubice sa pridá 4 ml 0,03% roztoku peroxidu vodíka, do experimentálnej testovacej skúmavky sa pridá 0,2 ml hemolyzovanej krvi (riedenie 1: 1000). Inhibinte vzorku 20 minút pri 37 ° C potom v oboch skúmavkách sa pripraví v 2 ml roztoku molybdénu amónneho a pri kontrole - ďalších 0,2 ml hemolyzátu. Miešajte. Zmerajte optickú hustotu experimentálnej a kontrolnej vzorky proti vode v modrom filtri. Stanovte aktivitu katalázy vzorcom:
(E k - e 0). 5600.
A \u003d -------------------
A - aktívnosť katalázy (ICMOL N 2O2 / min na ml krvi);
E to-zánik kontroly; E 0 - zánik skúseností;
V čase inkubácie min; 5600 - Koeficient
Normálne je aktivita katalázy 135 μmol H202 / min na ml
krv (v slinách -12-16 μmol). Aktivita katalázy v krvi sa môže znížiť s anémiou, rastom nádoru, tuberkulózy, niektorými ďalšími ochoreniami a zvýšenie akútnych zápalových procesov (v slinách so zápalovými procesmi ústnej sliznice).
Agráne a stručne odpovedzte na:
1. Môže oxidácia CH3-CH2-CH2 - IT ®
CH 3 - CH 2 - CH \u003d 0 v médiu bez kyslíka? Aké podmienky to je potrebné? Napíšte reakčnú schému.
2. Môže a s akou podmienkou v médiu bez kyslíka sa vyskytujú oxidácia typu CH3-CH2-CH \u003d O ® CH3-CH2 - SOAM? Uveďte potrebné komponenty, vykonajte reakčnú schému. Ako objasniť výskyt dvoch atómov kyslíka v reakčnom produkte.
3. Je výnimočný kyslík (len) konečným akceptorom vodíka v respiračnom reťazci tkaniva a všeobecne v biologickej oxidácii?
4. Prečo bola oxidácia vo voľne žijúcich živočíchovi identifikovanom spaľovaním mimo tela? Pomenujte vonkajšie príznaky podobnosti medzi popáleninou a oxidačným procesom v tele. Názov rozdielov medzi týmito procesmi.
5. Napíšte dehydrogenačné reakcie pripojení:
R-CH2-CH2-R; R-CH \u003d O; R - Sony -R; R-CH \u003d CH-R
6. Nastavte zhodu:
Redoxný potenciál: A. + 0,82; B. +0,10; V. + 0,25; G.- 0,22.
Zložka CPE: 1.ubikinon; 2.Corodorod; 3.FMN; 4. CYTROCHROM
7. Ktoré z uvedených zlúčenín sú substrátmi dehydrogenázy závislej od fad: glukóza, sacharóza; kyselina jantárová; Glycerín aldehyd, nadn +.
8. Napíšte schému elektrónovej a protónov z izokutrátu do kyslíka (izocitraterathydhydrogenázy - nadhodnotený enzým) a špecifikujte
názov všetkých enzýmových komplexov.
9. Liečivé prípravky - Baysovské deriváty:
A. Vzdialená hypnotická akcia.
B. Aktivujte dýchanie tkaniny.
Q. Inhibuje Nadn-dehydrogennase.
D. Príčina hypoenergetického stavu.
Laboratórne pracovné číslo 1
Úloha enzýmov pri urýchľovaní reakcie v bunke
(Identifikácia katalázy aktivity)
Účel: Detekujú účinok enzýmu katalázy v rastlinných a živočíšnych bunkách, porovnajte enzymatickú aktivitu prírodných a poškodených buniek varu buniek.
Vybavenie: 3% roztok peroxidu vodíka, kúsky surových a varených zemiakov a mäsa (pečeň, pľúca), skúmavky.
Detekcia katarázy
Cataláza je enzým, ktorý katalyzujúci rozklad peroxidu vodíka s tvorbou molekulárneho kyslíka uvoľneného vo forme plynových bublín:
kataláza
2 H202 _ → 2H 2 O + O 2
Peroxid vodíka je vytvorený v niektorých rastlinných a živočíšnych bunkách ako vedľajší produkt oxidačných reakčných reakcií. Táto zlúčenina je toxická pre bunky a kataláza zabezpečuje účinné odstránenie. Kataláza je jednou z najrýchlejších pracovných enzýmov: jedna molekula katalázy sa rozkladá za jednu sekundu až 200 000 molekúl peroxidov vodíka. Kataláza je lokalizovaná v membránových bublinách buniek - mikrotely a peroxymov.
Pokrok
Vezmite 4 čisté trubice a umiestnite malé množstvo jemných zemiakov v prvom z nich, v druhom - trochu varených zemiakov, v treťom - jemne nakrájaných kúskoch mäsa (pečeň, blesk), vo štvrtom - trochu drvene varené mäso. Do každej skúmavky pridajte 3-4 ml. 3% roztok peroxidu vodíka. Nákup Čo sa deje v skúmavkách. Výsledky sledovania zahŕňajú v tabuľke.
Enzymatická aktivita prírodných a poškodených buniek
| Objekt | Fenomény pozorované v testovacej trubici | Vysvetlenie pripomienok |
| Surové zemiaky | _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ | _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ |
| Varené zemiaky | _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ | _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ |
| Surové mäso | _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ | _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ |
| Varené mäso | _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ | _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ |
Vysvetlite získané výsledky. Ukončite záver o katalytickej aktivite katalázy v živých a mŕtvych bunkách.
Výkon: ________
_______________
_______________
_____________
Kontrolné otázky:
1. Čo sú enzýmy? Aká štruktúra proteínov je vytvorená ich aktivitami? ___________
2. Aké vlastnosti majú enzýmy? ______
3. Čo sa nazýva aktívne enzýmové centrum? Koľko takýchto centier môže byť v enzýme? _
4. Kvôli tomu, čo enzýmy urýchlia chemické reakcie? ___________________________
5. * Alkohol, fenol, chlór a iné antiseptiká sa používajú v lieku na liečbu oblastí tela kontaminovaného patogénnou flórou. Vysvetli prečo ._____
Gr .___ 3.
Laboratórne pracovné číslo 2
Detekcia organických látok
Účel: Eleterátne organické látky v tkanivách (škrob, bielkoviny, tuky) a preskúmať ich vlastnosti.
Vybavenie:gázová taška, brúsenie pšeničných zŕn (pšeničná múka), 5% roztok jódu, slnečnicové semená (alebo akákoľvek iná oblasť olejnatá: bavlna, LNA, arašidy, sójové boybean atď.).
Organické zlúčeniny - látky obsahujúce uhlík charakteristické pre voľne žijúce zvieratá sú v priemere 20-30% hmotnosti buniek živých organizmov. Hlavné vlastnosti buniek a organizmov sú stanovené organickými polymérmi: proteíny, sacharidy, nukleové kyseliny, ako aj komplexné zlúčeniny - tuky a množstvo molekúl hormónov, pigmentov, samostatných nukleotidov, najmä ATP. Okrem organických látok v bunkách sú obsiahnuté minerálne látky a voda, ale obsah organických látok je vždy vyšší. Množstvo organických látok môže byť odlišné.
Proteíny -nepravidelné alebo informačné, polyméry, ktorých monoméry sú aminokyseliny.
Vo svojom zložení sú proteíny rozdelené do:
- jednoduchý - pozostávajú zo samotných aminokyselín. Napríklad rastlinné proteíny sú prolaminones, sú obsiahnuté v lepku obilnín, sa nerozpustí vo vode;
- sofistikovaný - Okrem aminokyselín, iné organické zlúčeniny (nukleové kyseliny, lipidy, sacharidy), zlúčeniny fosforu, kovy sú vo svojej kompozícii. V súlade s tým nosia mená: nukleoproteis, lipoproteíny, glykoproteíny, fosfo a metaloproteíny.
Sacharidy - Zlúčeniny obsahujúce uhlík, vodík a kyslík. Rozdelené na mono-, di- a polysacharidy. Polysacharidy sú vysoko molekulárne sacharidy pozostávajúce z veľkého počtu monosacharidov, ich molekulová hmotnosť je veľká, molekuly majú lineárnu alebo rozvetvenú štruktúru. V funkčnosti sa rozlišujú polysacharidy zálohovania a štrukturálneho účelu. Nerozpustné vo vode škrob - hlavné rezervné polysacharid rastlinných buniek (polymér ά - glukóza); Pod akciou na ňom, jód svieti; Obsiahnuté vo veľkom počte v zemiakových hľúze, ovocie, semená. Glykogén- Polysacharid obsiahnutý v ľudských telesných tkanív a zvieratách, ako aj v húb a kvasinkách zohráva dôležitú úlohu pri transformácii sacharidov v bunkách. Vlákno (celulóza) - Hlavný štrukturálny polysacharid rastlín bunkových škrupín.
Lipidy a lipoidy- tuky a listnaté látky - organické zlúčeniny s rôznou štruktúrou. Neupustia sa vo vode, ale sú dobre rozpustené v organických zlúčeninách: éter, benzín, chloroform atď.
Podľa chemickej štruktúry lipidu - zlúčeniny glycerolu - Trotham alkoholu - s vysokými molekulovými organickými kyselinami (tuk) nemajú polymérnu štruktúru.
Zloženie semien
Laboratórne pracovné číslo 1Téma: Katalytická aktivita enzýmov v živých bunkách
Účel: Identifikujte katalytickú funkciu proteínov v živých bunkách, tvoria poznatky o úlohe enzýmov v bunkách, konsolidovať schopnosť pracovať s mikroskopom, vykonávať experimenty a vysvetliť výsledky práce. Vybavenie: Surové a varené zemiaky, slonový list (iné rastliny), čerstvé 3% roztok peroxidu vodíka, skúmavky, pinzety, piesok, malty a palička, notebook, pero, jednoduchú ceruzku, riadok.
Pokrok:
Pripravte si dva a miesto v prvom malých piesku, v druhom mieste - kúsok surových zemiakov, do tretieho - plátok varených zemiakov, pridajte trochu peroxidu vodíka do každej z rúrok. Skočiť, čo sa stane v každej z trubíc.
Brúsiť kus surových zemiakov do malty s malým množstvom piesku.
Preneste nasekané zemiaky spolu s pieskom do skúmavky a kvapká trochu peroxid vodíka.
Porovnajte činnosť rozdrveného a celého tkaniva.
Urobte tabuľku ukazujúcu aktivitu každého tkaniva s rôznym spracovaním. Vysvetlite získané výsledky. Odpovedz na otázku:
Pozorovania
Peroxid vodíka a surové zemiaky
Kyslík sa uvoľní, proteín sa rozkladá na primárnu štruktúru a zmení sa na penu
Peroxid vodíka a varené zemiaky
Žiadne reakcie
Odpoveď Otázky: Aké skúmavky vykazovali aktivitu enzýmu katalázy? Vysvetli prečo.
Kataláza enzým katalyzuje rozkladnú reakciu peroxidu vodíka do vody a molekulového kyslíka: H202 + H202 \u003d 02 + 2N2O. Biologickou úlohou K. je degradácia peroxidu vodíka vytvoreného v bunkách v dôsledku série flavoproteín oxidázy (xantín oxidáza, glukóza oxidáza, monoaminoxidáza, atď.), A zabezpečenie účinnej ochrany bunkových štruktúr od zničenia podľa účinku peroxidu vodíka. Geneticky stanovený nedostatok K. je jednou z príčin tzv. ACAATALANCE - dedičného ochorenia, klinicky prejavuje ulceráciou nosovej sliznice a ústnej dutiny, niekedy ostro výrazné atrofické zmeny v alveolárnych oddieloch a zubná strata . Aktivita sa prejavuje v 1.3 skúšaných skúmavkach, pretože Mali surové potraviny obsahujúce proteíny. A vo zvyšku skúmaviek boli produkty s chráneným chráneným v procese varenia a reakcia sa neprejavila. Preto je organizmus lepšie absorbovaný produktmi obsahujúcimi proteín.
Ako sa prejavia enzýmová aktivita a mŕtve tkaniny?Vysvetlite pozorovaný fenomén. V mŕtvych tkaninách neexistuje žiadna aktivita enzýmov, pretože Proteín v nich bol zničený počas varenia. A v živých tkanivách sa kyslík uvoľnil pri interakcii s peroxidom vodíka a proteín rozdelený na primárnu štruktúru sa transformovala na penu.
Ako sa sekanie tkaniny ovplyvňuje aktivitu enzýmu v živých tkanivách rastlín a zvierat? Pri brúsení živého tkaniva, reakcia prechádza rýchlejšie, pretože Oblasť kontaktu proteínu a peroxidu vodíka sa zvyšuje, ako by ste navrhli meranie miery rozkladu peroxidu vodíka? V \u003d KC (A) C (B) kde V je rýchlosť chemickej reakcie K - rýchlosť konštantu C - zmena koncentrácie, ako si myslíte, či všetky živých organizmov obsahujú enzým katalázu, ktorý poskytuje rozklad peroxidu vodíka ?
Odôvodnenie odpovede. Vzhľadom k tomu, že ide o enzýmovú triedu oxidoreduc, to katalyzuje rozklad toxický pre živé bunky peroxidu vodíka do vody a kyslíka. Obsiahnuté v lyzozómoch. Je možné dospieť k záveru, že je obsiahnutý vo všetkých bunkách živých organizmov. Vysvetlite svoje pozorovania. Výstup slov.
Záver: Proteín je obsiahnutý len v živých produktoch av varených produktoch zničených, takže sa s nimi nedeje žiadna reakcia. Ak sú výrobky rozdrvené, reakcia prejde rýchlejšie.