प्रयोगशाला कार्य। उत्प्रेरक गतिविधि का निर्धारण

(एएन। बहू और एआई ओपारीना के अनुसार)

शरीर के जीवन के आधार पर सभी विविध परिवर्तन जैविक उत्प्रेरक की भागीदारी के साथ होते हैं - एंजाइम जो विशिष्ट प्रोटीन होते हैं।

एंजाइमों के लिए धन्यवाद, जीवित कोशिकाओं की अद्भुत विशेषताओं में से एक प्रकट होता है - बहुत ही कम समय में और अपेक्षाकृत कम शरीर के तापमान पर सबसे जटिल प्रतिक्रियाओं को लागू करने की क्षमता। इस घटना का जैविक महत्व बहुत बड़ा है।

एंजाइमों की कार्रवाई का अध्ययन करने के लिए, उन्हें जीवित ऊतकों से आवंटित करना आवश्यक है। आम तौर पर, इस उद्देश्य के लिए, इस एंजाइम में समृद्ध आसानी से सुलभ स्रोत का चयन किया जाता है। समाधान में एंजाइम का अनुवाद करने के लिए, सेल शैल को नष्ट करना आवश्यक है, जो एक होमोजेनाइज़र का उपयोग करके हासिल किया जाता है, मोर्टार, फ्रीजिंग और थॉविंग, ऑटोलिसिस इत्यादि के साथ मोर्टार में रगड़ता है, आमतौर पर, सेलुलर के गोले का विनाश होता है कम तापमान पर, जिसके कारण सभी एंजाइमेटिक प्रक्रियाओं को ऊतकों में निलंबित कर दिया जाता है।

रेडॉक्स एंजाइमों के समूह में एंजाइम युक्त एक हेम शामिल है केटालेज़जो आणविक ऑक्सीजन की रिहाई के साथ हाइड्रोजन पेरोक्साइड के अपघटन की प्रतिक्रिया को उत्प्रेरित करता है:

2 एन 2 ओ 2 - > 2 एच 2 ओ + ओ 2

कैटलस एक जीवित जीव के अधिकांश कपड़े में स्थित है।

विधि का सिद्धांत।

उत्प्रेरक द्वारा हाइड्रोजन पेरोक्साइड विघटित है। हाइड्रोजन पेरोक्साइड की अधिकता को एक अम्लीय वातावरण में पोटेशियम परमैंगनेट द्वारा शीर्षक दिया जाता है। प्रतिक्रिया समीकरण के तहत है:

2 Kmno 4 + 5 एच 2 ओ 2 + 3 एच 2 सो 4 - > 2 mnso 4 + k 2 तो 4 + 8 h 2 o + 5 o 2

प्रयोग में, शेष गैर-विनाशकारी हाइड्रोजन पेरोक्साइड की संख्या निर्धारित की जाती है, नियंत्रण में - हाइड्रोजन पेरोक्साइड की कुल संख्या (नियंत्रण नमूने में उत्प्रेरक उबलते हुए निष्क्रिय है)।

नियंत्रण के परिणामों से अनुभव के परिणामों को सम्मानित किया, एक निश्चित अवधि में नष्ट हाइड्रोजन पेरोक्साइड की संख्या सीखें, जिससे उत्प्रेरक की गतिविधि का न्याय करना संभव हो जाता है।

उपकरण: 1. 50 और 100 मिलीलीटर (1 पीसी) द्वारा निर्देशित करता है

2. 10 मिलीलीटर पर सिलेंडर

3. मूसल के साथ मोर्टार

4. प्रति 200-250 मिलीलीटर प्रति शंकु फ्लास्क (2 पीसी)

5. भिन्नताओं के साथ तकनीकी तराजू

6. 10 मिलीलीटर "एंजाइम निकास" पर विंदुक

7. पिपेट "एच 2 सो 4"

8. उबलते पानी के स्नान

9. स्पुतुला

10. प्रति 100 मिलीलीटर फ्लास्क मेर्नी

11. वोरोनेक

12. फ़िल्टर पेपर

सामग्री: 1. ताजा सब्जी सामग्री (गाजर या आलू)

2. 0.1 एच 2 ओ 2 समाधान

3. 0.1 एन kmno4 समाधान

4. 10% समाधान एच 2 तो 4

5. saco 3 (क्रिस्ट)

6. रेत क्वार्ट्ज

प्रगति:

कच्चे आलू (या गाजर) के 2 ग्राम एक मोर्टार में क्वार्ट्ज रेत के साथ ट्रिटुरेटेड होते हैं, धीरे-धीरे 2-3 मिलीलीटर पानी जोड़ते हैं। एसिड प्रतिक्रिया को कम करने के लिए, कार्बन डाइऑक्साइड बुलबुले के विसर्जन को रोकने के लिए कैल्शियम कार्बोनेट स्पाइक जोड़ें। द्रव्यमान मात्रात्मक रूप से मापने वाले फ्लास्क में स्थानांतरित हो जाता है और पानी के साथ 100 मिलीलीटर लाता है। मिश्रण 30-60 मिनट के लिए खड़े होने के लिए छोड़ दिया जाता है, जिसके बाद इसे फ़िल्टर किया जाता है।

200 मिलीलीटर पर एक शंकु फ्लास्क में, 0.1h हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान के 25 मिलीलीटर एक ब्यूरेट से लिया जाता है और एंजाइम निकास के 20 मिलीलीटर का एक विंदुक वहां जोड़ा जाता है। 30 मिनट के बाद, एंजाइम की क्रिया को सल्फ्यूरिक एसिड के 10% समाधान के 5 मिलीलीटर जोड़कर बंद कर दिया जाता है और 0.1h पोटेशियम परमैंगनेट समाधान का मिश्रण (गुलाबी धुंध के लगभग 1 मिनट के लिए प्रतिरोधी के गठन से पहले) को बंद कर दिया जाता है। पोटेशियम परमैंगनेट समाधान के मिलीलीटर की संख्या, जो शेष हाइड्रोजन पेरोक्साइड के शीर्षक पर गई थी, नोट किया गया था।

साथ ही, उन्हें ठंडा होने के बाद इस समाधान के लिए एक एंजाइम समाधान (20 मिलीलीटर) द्वारा 5 मिनट के लिए एक उबलते पानी के स्नान में निष्क्रिय हीटिंग के साथ नियंत्रित किया जाता है, 0.1h हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान का 25 मिलीलीटर जोड़ा जाता है। मिश्रण को 30 मिनट तक खड़े होने के लिए छोड़ दिया जाता है, जिसके बाद सल्फ्यूरिक एसिड के 10% समाधान के 5 मिलीलीटर को जोड़ा जाता है और शीर्षक 0.1 एच पोटेशियम परमैंगनेट समाधान के साथ किया जाता है। मिलिलिटर्स परमैंगनेट पोटेशियम की संख्या, जो हाइड्रोजन पेरोक्साइड की कुल राशि शीर्षक पर गई।

प्रयोगात्मक और नियंत्रण टाइट्रेशन के बीच के अंतर के संदर्भ में, परमैंगनेट की मात्रा विघटित हाइड्रोजन पेरोक्साइड की मात्रा के बराबर पाई जाती है। केएमएनओ 4 और एच 2 ओ 2 के बीच प्रतिक्रिया समीकरण के अनुसार, पोटेशियम परमैंगनेट के 0.1 एच स्थायी समाधान के 1 मिलीलीटर 1.7 मिलीग्राम हाइड्रोजन पेरोक्साइड से मेल खाती है।

गणना का उदाहरण।

1.25 ग्राम गाजर ने 100 मिलीलीटर की मात्रा के साथ एक कैटलस निकास तैयार किया। प्रायोगिक नमूना के शीर्षक पर 15.5 एमएल परीक्षण का विस्तार किया गया, पोटेशियम परमैंगनेट के 0.1 एच स्थायी समाधान के नियंत्रण -30.2 मिलीलीटर। नमूना में विघटित हाइड्रोजन पेरोक्साइड की मात्रा 30.2-15.5 \u003d 14.7 एमएल के बराबर है जो पोटेशियम परमैंगनेट के 0.1 एच स्थायी समाधान के बराबर है और इसलिए, 14.7 * 1.7 \u003d 24.99 मिलीग्राम।

क्रूड गाजर के 1 ग्राम में, इसमें कैटलस की मात्रा होती है, 30 मिनट (24.99 * 100) / (20 * 1.25) \u003d 99.9 6 मिलीग्राम हाइड्रोजन पेरोक्साइड के 99.96 मिलीग्राम में विघटित करने में सक्षम, और 1 मिनट - 99.9 6/30 \u003d 3.33 मिलीग्राम के लिए। जैसा

हाइड्रोजन पेरोक्साइड का 1 माइक्रोन 0.034 मिलीग्राम है, फिर 33.3 / 0.034 \u003d कैटाइरेस के 100 ई गाजर के 1 ग्राम में मौजूद हैं।

प्रयोगशाला कार्य संख्या 4।

खमीर कोशिकाओं से संस्कार की तैयारी। एंजाइमों की कार्रवाई की विशिष्टता।

सभी विविध रासायनिक परिवर्तन, जो शरीर के जीवन का आधार बनाते हैं, जैविक उत्प्रेरक - एंजाइमों की भागीदारी के साथ आगे बढ़ते हैं, जो एन ई सी और एफ और एच सी और एम और बी ई एल के और एम और के साथ हैं।

एंजाइमों के लिए धन्यवाद, जीवित कोशिकाओं की उल्लेखनीय विशेषताओं में से एक प्रकट होता है - बहुत ही कम समय में सबसे जटिल प्रतिक्रियाओं को लागू करने और कम शरीर के तापमान पर अपेक्षाकृत लागू करने की क्षमता।

एंजाइमों के गुणों का अध्ययन, उनकी कार्रवाई की शर्तों, विभिन्न अंगों और ऊतकों में एंजाइमों की सामग्री का निर्धारण शरीर के जीवन की सबसे जटिल प्रक्रियाओं की सही समझ के लिए बहुत महत्वपूर्ण है।

एंजाइमों के सबसे महत्वपूर्ण गुणों में से एक विशिष्ट सब्सट्रेट के संबंध में उनकी कार्रवाई की विशिष्टता है। एंजाइमों के उत्प्रेरक गुणों की विशिष्टता इस तथ्य में प्रकट होती है कि एंजाइम, एक नियम के रूप में, केवल एक निश्चित पदार्थ पर कार्य करता है। एंजाइमों की सख्त विशिष्टता इस तथ्य को इंगित करती है कि स्टीरियोइसोमेरिया के मामलों में, एक निश्चित एंजाइम केवल एक स्टीरियोइसर विभाजन को उत्प्रेरित करता है। एंजाइमों की विशिष्टता उनकी आवश्यक जैविक संपत्ति है, जिसके बिना आदेशित चयापचय असंभव है।

इस पेपर में, एंजाइम सहारा सब्सट्रेट द्वारा विभाजन की प्रक्रियाएं - सुक्रोज और एंजाइम द्वारा स्टार्च के विभाजन - एमिलेज़, जो मानव लार में निहित है।

खमीर कोशिकाओं से संस्कार का निष्कर्षण

सामग्री और अभिकर्मकों:

· दबाया खमीर - 10 ग्राम

Homogenizer (मूसल के साथ मोर्टार)

· रेत क्वार्ट्ज

· आसुत जल

प्रगति

सूखे खमीर के 10 ग्राम एक मोर्टार में डाल दिया, 10 मिलीलीटर आसुत पानी में जोड़ें और सेल दीवारों के विनाश के लिए क्वार्ट्ज रेत की एक छोटी राशि के साथ एक चीनी मिट्टी के बरतन मोर्टार में homogenize जोड़ें। फिर एक होमोजेलाइजेट के साथ एक चीनी मिट्टी के बरतन मोर्टार को एक सुखाने कैबिनेट में रखा जाता है जिसमें 60 0 नींद 30-40 मिनट के तापमान के साथ रखा जाता है।

निर्दिष्ट समय समाप्त होने के बाद, मोर्टार को हटाएं, ठंडा करें, आसुत पानी के 30 मिलीलीटर जोड़ें और मोर्टार की सामग्री को एक सजातीय द्रव्यमान में रगड़ें।

फिर, होमोजेनाइजेट, सेल द्रव्यमान को दूर करने के लिए, 15 मिनट के लिए 3000 आरपीएम पर केंद्रित। परिणामी सतह पर तैरनेवाला चीनी का निकास है।

प्रयोगशाला कार्य

उत्प्रेरक गतिविधि का निर्धारण (1.11.1.6)

1) पोटेशियम परमैंगनेट और कैटलस गणना के साथ(बाच और जुबकोव विधि)

विधि का सिद्धांत। कैटलस एंजाइम लाल रक्त कोशिकाओं, साथ ही साथ सभी ऊतकों और शरीर के तरल पदार्थों में बड़ी मात्रा में निहित है। उत्प्रेरक की जैविक भूमिका हाइड्रोजन पेरोक्साइड (एन) को बेअसर करना है2 ओ 2। ) आणविक ऑक्सीजन और पानी पर अपघटन द्वारा:

2 एन 2 ओ 2 → ओ 2 + 2 एन 2 ओ

एंजाइम की गतिविधि एक उत्प्रेरक और उत्प्रेरक संकेतक का उपयोग करके व्यक्त की जाती है।कैटलस संख्या वे हाइड्रोजन पेरोक्साइड की मात्रा कहते हैं, जो एक निश्चित अवधि में रक्त के 1.0 μl को विभाजित करता है। प्रक्षेपित हाइड्रोजन पेरोक्साइड की मात्रा को पोटेशियम परमैंगनेट की संख्या में अंतर से फैसला किया जाता है, जो नियंत्रण और प्रोटोटाइप के शीर्षक पर गया था।

कैटलस संकेतक अध्ययन के तहत रक्त के 1.0 μl में लाखों एरिथ्रोसाइट्स की राशि के उत्प्रेरक संख्या के अनुपात की गणना करें।

अभिकर्मकों: 1) 1% समाधान एच 2 ओ 2; 2) 10% सल्फ्यूरिक एसिड समाधान; 3) 0.1 एम पोटेशियम परमैंगनेट समाधान (टाइट्रेशन के लिए)।

अध्ययन का उद्देश्य: 1: 1000 अनुपात में रक्त आसुत पानी का प्रजनन करके प्राप्तमोलिज़ेट।

खाना बनाना : 10 मिलीलीटर आसुत पानी प्रति 100 मिलीलीटर आयामी फ्लास्क में डाला जाता है और 0.1 मिलीलीटर रक्त को माइक्रोप्रिपेट में जोड़ा जाता है। पिपेट को कई बार एक ही समाधान धोया जाता है। पानी को फ्लास्क में लेबल में जोड़ा जाता है और रक्त (1: 1000) का आधार समाधान प्राप्त होता है, जिसका उपयोग कैटलस संख्या निर्धारित करने के लिए किया जाता है।

प्रगति।

दो टेटिंग फ्लास्क (अनुभव और नियंत्रण) में 7 मिलीलीटर पानी डाला गया और प्रत्येक में मुख्य रक्त समाधान के 1 मिलीलीटर जोड़ें। प्रत्येक फ्लास्क बिल्कुल 2 मिलीलीटर बनाया जाता है। कैटलस को विभाजित करने के लिए नियंत्रण फ्लास्क में 3 मिलीलीटर जोड़ा जाता है। दोनों फ्लास्क कमरे के तापमान पर 30 मिनट के लिए ऊष्मायन होते हैं। फिर, 10% सल्फेट एसिड समाधान के 3 मिलीलीटर एक प्रयोगात्मक फ्लास्क में डाला जाता है। गुलाबी धुंधला दिखाई देने तक दोनों फ्लास्क की सामग्री 0.1 मीटर पोटेशियम परमैंगनेट समाधान द्वारा निर्धारित की जाती है। 1.7 द्वारा अनुभव और नियंत्रण के परिणामों के बीच एकाधिक अंतर और रक्त की उत्प्रेरक संख्या प्राप्त करें।

गणना का उदाहरण : मोल समकक्ष एन2 ओ 2। बराबर 17 ग्राम। तो, 0.1 मीटर के 1 मिलीलीटर में 1.7 मिलीग्राम होता है2 ओ 2। ; पोटेशियम परमैंगनेट समाधान के 0.1 मीटर के एमएल की मात्रा के बीच 1.7 को गुणा करना, जो नियंत्रण और प्रयोगात्मक फ्लास्क की सामग्री शीर्षक पर गया, एमजी की संख्या प्राप्त करता है2 ओ 2। जो अध्ययन के तहत रक्त के 1 μl को विभाजित करता है, यानी, वे तुरंत उत्प्रेरक की गणना करते हैं।

मानदंड: केटालेज़ 10 से 15 इकाइयों तक,

कैटलस संकेतक 2-3x10 है -: 6 , क्लिनिक में यह अधिक बार उपयोग किया जाता है

नैदानिक \u200b\u200bऔर नैदानिक \u200b\u200bमूल्य।उच्च उत्प्रेरक गतिविधि को हानिकारक और मैक्रोसाइटिक एनीमिया में देखा जाता है, साथ ही साथ शराब, कैफीन, शरीर को एसीटोन टेल में प्रवेश करते समय भी देखा जाता है। रक्त में उत्प्रेरक की गतिविधि कैंसर, एनीमिया, तपेदिक और अन्य बीमारियों के साथ कम हो जाती है।

2) अमोनियम मोलिबडेट का उपयोग करना

कैटलस जीव की एंटीऑक्सीडेंट प्रणाली के सबसे phylogenetically प्राचीन एंजाइमों में से एक है, ऑक्सीडोरक्टेज की कक्षा को संदर्भित करता है, रेडॉक्स प्रतिक्रियाओं को उत्प्रेरित करता है, सब्सट्रेट का उपयोग करके हाइड्रोप्रोक्सिडेस समूह में शामिल है2 ओ 2 (2 एच 2 ओ 2 → 2 एन 2 ओ + ओ 2 ) या कार्बनिक जल विद्युत, इसलिए, कैटलस के साथ, इसमें पेरोक्साइड गतिविधि है। संरचना के अनुसार - हेमोप्रोटीन जिसमें 4 हेम समूह होते हैं। कैटलस एक इंट्रासेल्यूलर एंजाइम है। परिसंचरण रक्त में, एंजाइम का बड़ा हिस्सा एरिथ्रोसाइट्स के साइटप्लाज्म में स्थानीयकृत होता है।

कैटलस फ़ंक्शन:

एंडोजेनस हाइड्रोजन पेरोक्साइड से शरीर की सुरक्षा में भाग लेता है, जो एरोबिक डीहाइड्रोजनेज के कामकाज के परिणामस्वरूप उत्पन्न होता है;

हाइड्रोक्साइल रेडिकल के गठन को दबाता है;

हीमोग्लोबिन के ऑक्सीकरण के खिलाफ सुरक्षा करता है और सेलुलर संरचनाओं के अंदर ऑक्सीजन के हस्तांतरण में योगदान देता है;

कुछ एमिनो एसिड के ऑक्सीडेटिव चयापचय में भाग लेता है;

एसएच-समूह के ऑक्सीकरण से बचाता है, जिनमें कई एंजाइमों और कार्यात्मक रूप से सक्रिय प्रोटीन के सक्रिय केंद्र में शामिल हैं।

विधि का सिद्धांत। उत्प्रेरक की गतिविधि सब्सट्रेट एंजाइम (हाइड्रोजन पेरोक्साइड) के रूपांतरण द्वारा निर्धारित की जाती है, जो अमोनियम मोलिबडेट लवण के साथ एक चित्रित परिसर के गठन में सक्षम है।

अभिकर्मकों। 1) 0.03% समाधान एच 2 ओ 2 ; 2) 4% अमोनियम molybdate समाधान।

जैविक सामग्री:रक्त का सीरम।

प्रगति। अनुभवी परीक्षण: 0.03% हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान के 2.0 मिलीलीटर से सीरम के 0.1 मिलीलीटर जोड़ें। मेंएक परीक्षण होना सीरम के बजाय - आसुत पानी के 0.1 मिलीलीटर।में नियंत्रण नमूना पेरोक्साइड के बजाय, 2.0 मिलीलीटर आसुत पानी जोड़ा जाता है। नमूने 37 पर 10 मिनट सेते हैं° सी, फिर अमोनियम मोलिबडेट के 4% समाधान के 1.0 मिलीलीटर जोड़कर प्रतिक्रिया को रोकें।4000 आरपीएम पर 10 मिनट अपकेंद्रित्र। 410 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर नियंत्रण के खिलाफ निष्क्रिय और प्रोटोटाइप की ऑप्टिकल घनत्व को मापें।

भुगतान सीरम में कैटलस गतिविधि:

ए (mkat / l) \u003d

जहां ई सेशन और ई - अनुभवी और निष्क्रिय नमूने का विलुप्त होने,

3.1 - सामान्य प्रजनन,

टी - समय ऊष्मायन, सी,

वी - घायल नमूने की मात्रा, एल,

22,210 3 - समाप्ति गुणांक,mmol -1 सेमी -1।

सीरम 2,6 में कैटलस गतिविधि+ 0.5 μut / एल

कार्य पंजीकरण।

विधि के सिद्धांत को रिकॉर्ड करें। परिणामों को ठीक करें, बाहर निकालें।

विधि का सिद्धांत:हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान के साथ मोलिब्डेनम-ऑक्सीड अमोनियम एक व्यापक पीला यौगिक बनाता है। निम्नलिखित सूत्र के अनुसार कैटलस हाइड्रोजन पेरोक्साइड को नष्ट कर देता है:

2 एन 2 ओ 2 \u003d 2 एन 2 ओ + ओ 2

समाधान के रंग की तीव्रता में कमी की डिग्री कैटलस की गतिविधि के आनुपातिक है।

प्रगति:0.03% हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान का 4 मिलीलीटर प्रयोगात्मक और नियंत्रण ट्यूब में जोड़ा जाता है, 0.2 मिलीलीटर हेमोलिज्ड रक्त प्रयोगात्मक परीक्षण ट्यूब (1: 1000 कमजोर पड़ने) में जोड़ा जाता है। 37 0 सी पर नमूना 20 मिनट को रोकें। फिर दोनों परीक्षण ट्यूबों में अमोनियम मोलिबडेट समाधान के 2 मिलीलीटर में बने होते हैं, और नियंत्रण में - एक अतिरिक्त 0.2 मिलीलीटर हेमोलिज़ेट। हलचल। नीले फ़िल्टर पर पानी के खिलाफ प्रयोगात्मक और नियंत्रण नमूने की ऑप्टिकल घनत्व को मापें। सूत्र द्वारा कैटलस की गतिविधि का निर्धारण करें:

(ई के - ई 0)। 5600।

A \u003d ------------------- जहां

और - उत्प्रेरक की सक्रियता (आईसीएमओएल एन 2 ओ 2 / न्यूनतम रक्त के प्रति एमएल);

नियंत्रण का ई-विलुप्त होना; ई 0 - अनुभव का विलुप्त होना;

ऊष्मायन के समय, मिनट; 5600 - गुणांक

आम तौर पर, कैटलस की गतिविधि 135 माइक्रोन एच 2 ओ 2 / मिनट प्रति एमएल है

रक्त (लार -12-16 μmol में)। रक्त में उत्प्रेरक की गतिविधि एनीमिया, ट्यूमर वृद्धि, तपेदिक, कुछ अन्य बीमारियों, और तीव्र सूजन प्रक्रियाओं में वृद्धि (मौखिक श्लेष्म की सूजन प्रक्रियाओं के साथ लार में) के साथ कम हो सकती है।

Agranulated और संक्षेप में निम्नलिखित का उत्तर दें:

1. Ch 3 - Ch 2 - Ch 2 - यह ® का ऑक्सीकरण कर सकते हैं

सी 3 - सीएच 2 - सी \u003d ओ ऑक्सीजन मुक्त माध्यम में? इसके लिए कौन सी स्थितियां जरूरी हैं? एक प्रतिक्रिया योजना लिखें।

2. क्या यह और ऑक्सीजन मुक्त माध्यम में किस स्थिति के साथ ऑक्सीकरण टाइप 3 - सीएच 2 - सीएच \u003d ओ ® सी 3 - सीएच 2 - सोम द्वारा ऑक्सीकरण होता है? आवश्यक घटकों को निर्दिष्ट करें, एक प्रतिक्रिया योजना बनाएं। प्रतिक्रिया उत्पाद में दो ऑक्सीजन परमाणुओं की उपस्थिति को स्पष्ट करने के लिए कैसे स्पष्ट करें।

3. क्या ऑक्सीजन असाधारण (केवल) एक ऊतक श्वसन श्रृंखला में एक सीमित हाइड्रोजन स्वीकार्य और जैविक ऑक्सीकरण में सामान्य रूप से?

4. वन्यजीवन में ऑक्सीकरण क्यों शरीर के बाहर जलने के साथ पहचाना गया था? शरीर में जलने और ऑक्सीकरण प्रक्रिया के बीच समानता के बाहरी संकेतों का नाम दें। इन प्रक्रियाओं के बीच मतभेदों का नाम दें।

5. कनेक्शन की डीहाइड्रोजनीकरण प्रतिक्रियाएं लिखें:

आर-सी 2-सीएच 2 - आर; R-ch \u003d o; आर - सोनी -आर; R-ch \u003d ch-r

6. अनुपालन सेट करें:

रेडॉक्स क्षमता: ए + 0.82; B. +0.10; बी + 0.25; जी.- 0.22।

घटक सीपीई: 1.बिकिनन; 2. कोरोडोरोड; 3.fmn; 4. साइटोक्रोम

7. कौन से सूचीबद्ध यौगिक फड-निर्भर डीहाइड्रोजनीज के सब्सट्रेट हैं: ग्लूकोज, सुक्रोज; स्यूसेनिक तेजाब; ग्लिसरीन Aldehyde, NADN +।

8. Isocatrate से ऑक्सीजन (isocitraterathydhydhydrogenase - अधिक निर्भर एंजाइम) से एक इलेक्ट्रॉन और प्रोटॉन योजना लिखें और निर्दिष्ट करें

सभी एंजाइम परिसरों का नाम।

9. औषधीय तैयारी - बटेरिव डेरिवेटिव्स:

ए। एक कृत्रिम निद्रावस्था कार्रवाई।

बी फैब्रिक श्वास सक्रिय करें।

प्र। Nadn-dehydrogennase को रोकें।

डी। एक हाइपोएनेटिक राज्य का कारण बनता है।

प्रयोगशाला कार्य संख्या 1

कोशिका में प्रतिक्रिया में तेजी लाने में एंजाइमों की भूमिका

(उत्प्रेरक गतिविधि की पहचान)

उद्देश्य: सब्जी और पशु कोशिकाओं में कैटलस एंजाइम की कार्रवाई का पता लगाएं, प्राकृतिक और क्षतिग्रस्त सेल उबलते कोशिकाओं की एंजाइमेटिक गतिविधि की तुलना करें।

उपकरण: हाइड्रोजन पेरोक्साइड का 3% समाधान, कच्चे और उबले हुए आलू के टुकड़े और मांस (यकृत, फेफड़ों), परीक्षण ट्यूब।

कैटलस गतिविधि का पता लगाना

कैटलस एक एंजाइम है जो गैस बुलबुले के रूप में जारी आणविक ऑक्सीजन के गठन के साथ हाइड्रोजन पेरोक्साइड अपघटन उत्प्रेरित करता है:

केटालेज़

2 एच 2 ओ 2 _ → 2 एच 2 ओ + ओ 2

हाइड्रोजन पेरोक्साइड को किसी भी संयंत्र और पशु कोशिकाओं में ऑक्सीडेटिव प्रतिक्रिया प्रतिक्रियाओं के उप-उत्पाद के रूप में बनाया जाता है। यह यौगिक कोशिकाओं के लिए विषाक्त है, और कैटलस कुशल हटाने सुनिश्चित करता है। कैटलस सबसे तेज़ काम करने वाले एंजाइमों में से एक है: एक कैटलस अणु एक सेकंड में 200,000 हाइड्रोजन पेरोक्साइड अणुओं में विघटित होता है। उत्प्रेरक कोशिकाओं के झिल्ली बुलबुले में स्थानीयकृत है - माइक्रोथल्स और पेरोक्सिम।

प्रगति

4 स्वच्छ ट्यूब लें और उनमें से पहले में एक छोटी आलू की एक छोटी मात्रा में रखें, दूसरे में - उबले हुए आलू का थोड़ा सा, तीसरे में - मांस के बारीक कटा हुआ टुकड़ा (यकृत, बिजली), चौथे में - थोड़ा कुचल उबला हुआ मांस। प्रत्येक टेस्ट ट्यूब में 3-4 मिलीलीटर जोड़ें। 3% हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान। परीक्षण ट्यूबों में क्या हो रहा है खरीद। निगरानी के परिणाम तालिका में शामिल हैं।

प्राकृतिक और क्षतिग्रस्त कोशिकाओं की एंजाइमेटिक गतिविधि

एक वस्तु	टेस्ट ट्यूब में फेनोमेना मनाया गया	अवलोकन की व्याख्या
कच्चा आलू	_____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________	_____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________
उबले हुए आलू	_____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________	_____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________
कच्चा मॉस	_____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________	_____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________
उबला हुआ मांस	_____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________	_____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________

प्राप्त परिणामों की व्याख्या करें। जीवित और मृत कोशिकाओं में उत्प्रेरक की उत्प्रेरक गतिविधि के बारे में निष्कर्ष निकालें।

आउटपुट: ________

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_______________

_____________

नियंत्रण प्रश्न:

1. एंजाइम क्या है? उनकी गतिविधि द्वारा प्रोटीन की संरचना क्या बनाई जाती है? ___________

2. एंजाइम क्या गुण हैं? ______

3. एक सक्रिय एंजाइम केंद्र कहा जाता है? एंजाइम में कितने केंद्र हो सकते हैं? _

4. क्या एंजाइम रासायनिक प्रतिक्रियाओं को तेज करते हैं? ___________________________

5. * शराब, फिनोल, क्लोरीन और अन्य एंटीसेप्टिक्स का उपयोग दवा में रोगजनक वनस्पति द्वारा दूषित शरीर के क्षेत्रों के इलाज के लिए किया जाता है। समझाइए क्यों ।_____

जीआर .___ 3।

प्रयोगशाला कार्य संख्या 2

कार्बनिक पदार्थों का पता लगाना

उद्देश्य: ऊतकों (स्टार्च, प्रोटीन, वसा) में विकृत कार्बनिक पदार्थ और उनकी संपत्तियों का पता लगाएं।

उपकरण:एक गौज बैग, गेहूं के अनाज पीसने (गेहूं का आटा), 5% आयोडीन समाधान, सूरजमुखी के बीज (या कोई अन्य तिलहन क्षेत्र: कपास, एलएनए, मूंगफली, सोयाबीन इत्यादि)।

कार्बनिक यौगिक - वन्यजीवन की कार्बन युक्त पदार्थ की विशेषता जीवों की कोशिकाओं के द्रव्यमान का औसत 20-30% है। कोशिकाओं और जीवों के मुख्य गुण कार्बनिक पॉलिमर द्वारा निर्धारित किए जाते हैं: प्रोटीन, कार्बोहाइड्रेट, न्यूक्लिक एसिड, साथ ही जटिल यौगिकों - वसा और कई हार्मोन अणुओं, वर्णक, अलग न्यूक्लियोटाइड, विशेष रूप से एटीपी में। कोशिकाओं, खनिज पदार्थों और पानी में कार्बनिक पदार्थों के अलावा निहित हैं, लेकिन कार्बनिक पदार्थों की सामग्री हमेशा अधिक होती है। कार्बनिक पदार्थों की मात्रा अलग हो सकती है।

प्रोटीन -अनियमित, या सूचनात्मक, पॉलिमर जिनकी मोनोमर्स एमिनो एसिड हैं।

इसकी संरचना में, प्रोटीन में विभाजित हैं:

- सरल - अकेले एमिनो एसिड से मिलकर। उदाहरण के लिए, सब्जी प्रोटीन प्रोलोनोन हैं, वे अनाज के लसों के बीज में निहित हैं, पानी में भंग नहीं करते हैं;

- जटिल - एमिनो एसिड के अलावा, अन्य कार्बनिक यौगिकों (न्यूक्लिक एसिड, लिपिड्स, कार्बोहाइड्रेट), फॉस्फोरस यौगिकों, धातु अपनी संरचना में हैं। तदनुसार, वे नाम पहनते हैं: न्यूक्लियोपोटिस, लिपोप्रोटीन, ग्लाइकोप्रोटीन, फॉस्फो- और मेटलप्रोटीन।

कार्बोहाइड्रेट्स - कार्बन, हाइड्रोजन और ऑक्सीजन युक्त यौगिक। मोनो-, di- और polysaccharides में विभाजित। पोलिसाक्राइड्स उच्च-आणविक कार्बोहाइड्रेट होते हैं जिनमें बड़ी संख्या में मोनोसैकाइराइड होते हैं, उनके आणविक वजन बड़े होते हैं, अणुओं में एक रैखिक या ब्रांडेड संरचना होती है। कार्यक्षमता में, बैकअप और संरचनात्मक उद्देश्यों के polysaccharides प्रतिष्ठित हैं। पानी में घुलनशील नहीं स्टार्च - सब्जी कोशिकाओं (पॉलिमर ά - ग्लूकोज) के मुख्य रिजर्व polysaccharide; उस पर कार्रवाई के तहत, आयोडीन चमकता है; आलू के कंद, फलों, बीजों में बड़ी संख्या में निहित। ग्लाइकोजन- मानव शरीर के ऊतकों और जानवरों के साथ-साथ मशरूम और खमीर में निहित पोलिसाक्राइड, कोशिकाओं में कार्बोहाइड्रेट के परिवर्तन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। फाइबर (सेलूलोज़) - पौधों सेल गोले के मुख्य संरचनात्मक polysaccharide।

लिपिड और लिपोइड्स- वसा और पत्तेदार पदार्थ - विभिन्न संरचना के साथ कार्बनिक यौगिकों। वे पानी में भंग नहीं होते हैं, लेकिन वे कार्बनिक यौगिकों में अच्छी तरह से भंग होते हैं: ईथर, गैसोलीन, क्लोरोफॉर्म इत्यादि।

लिपिड की रासायनिक संरचना के अनुसार - ग्लिसरॉल के यौगिक - ट्रॉथम अल्कोहल - उच्च आणविक कार्बनिक एसिड (एफएटी) के साथ, पॉलिमर संरचना नहीं है।

बीज की संरचना

प्रयोगशाला कार्य संख्या 1

विषय: जीवित कोशिकाओं में एंजाइमों की उत्प्रेरक गतिविधि

उद्देश्य: जीवित कोशिकाओं में प्रोटीन के उत्प्रेरक कार्य की पहचान करें, कोशिकाओं में एंजाइमों की भूमिका के बारे में ज्ञान बनाएं, एक माइक्रोस्कोप के साथ काम करने की क्षमता को समेकित करें, प्रयोगों का संचालन करें और कार्य के परिणामों की व्याख्या करें। उपकरण: कच्चे और उबले हुए आलू, हाथी पत्ता (अन्य पौधे), ताजा 3% हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान, टेस्ट ट्यूब, चिमटी, रेत, मोर्टार और मूसल, नोटबुक, पेन, सरल पेंसिल, लाइन।

प्रगति:

दो तैयार करें, और पहले छोटी रेत में रखें, दूसरे में - कच्चे आलू का एक टुकड़ा, तीसरे स्थान पर - उबले हुए आलू का एक टुकड़ा, प्रत्येक ट्यूब में हाइड्रोजन पेरोक्साइड का थोड़ा सा जोड़ें। प्रत्येक ट्यूब में क्या होगा बाहर कूदो।

कच्चे आलू का एक टुकड़ा एक मोर्टार में एक छोटी मात्रा में रेत के साथ पीस लें।

कटा हुआ आलू को टेस्ट ट्यूब में रेत के साथ स्थानांतरित करें और थोड़ा हाइड्रोजन पेरोक्साइड ड्रॉप करें।

कुचल और पूरे पौधे के ऊतक की गतिविधि की तुलना करें।

विभिन्न प्रसंस्करण के साथ प्रत्येक ऊतक की गतिविधि दिखाते हुए एक टेबल बनाएं। प्राप्त परिणामों की व्याख्या करें। प्रश्नों के उत्तर दें:

टिप्पणियों

हाइड्रोजन पेरोक्साइड और कच्चे आलू

ऑक्सीजन जारी किया जाता है, प्रोटीन प्राथमिक संरचना को विघटित करता है और फोम में बदल जाता है

हाइड्रोजन पेरोक्साइड और उबला हुआ आलू

कोई प्रतिक्रिया नहीं

उत्तर प्रश्न: किस परीक्षण ट्यूबों ने कैटलस एंजाइम की गतिविधि को दिखाया? समझाइए क्यों।

कैटलस एंजाइम पानी और आण्विक ऑक्सीजन में हाइड्रोजन पेरोक्साइड की अपघटन प्रतिक्रिया उत्प्रेरित करता है: H2O2 + H2O2 \u003d O2 + 2N2O। के। की जैविक भूमिका फ्लैवोप्रोटीन ऑक्सीडास (xanthine ऑक्सीडेस, ग्लूकोज ऑक्सीडेस, मोनोमामिनॉक्सिडेस इत्यादि) की एक श्रृंखला के परिणामस्वरूप कोशिकाओं में गठित हाइड्रोजन पेरोक्साइड का अवक्रमण है, और कार्रवाई के तहत विनाश से सेलुलर संरचनाओं की प्रभावी सुरक्षा सुनिश्चित करना हाइड्रोजन पेरोक्साइड का। के। की आनुवंशिक रूप से निर्धारित कमी तथाकथित निलंबन के कारणों में से एक है - एक वंशानुगत बीमारी, नैतिक रूप से नाक श्लेष्मा और मौखिक गुहा के अल्सर द्वारा प्रकट होती है, कभी-कभी अलौकिक विभाजन और दांत हानि में एट्रोफिक परिवर्तनों का स्पष्ट रूप से स्पष्ट होता है । 1.3 परीक्षण ट्यूबों में प्रकट गतिविधि, क्योंकि उनके पास प्रोटीन युक्त कच्चे खाद्य पदार्थ थे। और शेष परीक्षण ट्यूबों में खाना पकाने की प्रक्रिया में संरक्षित संरक्षित उत्पादों के साथ उत्पाद थे और प्रतिक्रिया प्रकट नहीं हुई थी। इसलिए, जीव प्रोटीन युक्त उत्पादों द्वारा बेहतर अवशोषित किया जाता है।

एंजाइम गतिविधि और मृत कपड़े कैसे प्रकट होते हैं?देखी गई घटना की व्याख्या करें। मृत कपड़े में एंजाइमों की कोई गतिविधि नहीं है, क्योंकि उनमें से प्रोटीन खाना पकाने के दौरान नष्ट हो गया था। और जीवित ऊतकों में, हाइड्रोजन पेरोक्साइड के साथ बातचीत करते समय ऑक्सीजन जारी किया गया था, और प्राथमिक संरचना में प्रोटीन विभाजित फोम में बदल गया था।

कपड़े के काटने से पौधों और जानवरों के जीवित ऊतकों में एंजाइम की गतिविधि को कैसे प्रभावित होता है? जब जीवित ऊतक पीसते हैं, तो प्रतिक्रिया तेजी से गुजरती है, क्योंकि प्रोटीन और हाइड्रोजन पेरोक्साइड के संपर्क का क्षेत्र बढ़ता है आप हाइड्रोजन पेरोक्साइड की अपघटन दर को मापने का सुझाव कैसे देते हैं? वी \u003d केसी (ए) सी (बी) जहां वी रासायनिक प्रतिक्रिया की गति है - दर निरंतर सी - एकाग्रता में बदलाव जैसा कि आप सोचते हैं, चाहे सभी जीवित जीवों में एक कैटलस एंजाइम होता है जो हाइड्रोजन पेरोक्साइड का अपघटन प्रदान करता है ?

उत्तर को सही ठहराया। चूंकि यह एक एंजाइम वर्ग ऑक्सीडोरक्टज़ है, यह हाइड्रोजन पेरोक्साइड की जीवित कोशिकाओं और ऑक्सीजन में जीवित कोशिकाओं के लिए जहरीले के अपघटन को उत्प्रेरित करता है। Lysosomes में निहित। यह निष्कर्ष निकाला जा सकता है कि जीवित जीवों की सभी कोशिकाओं में निहित है। अपने अवलोकन की व्याख्या करें। शब्द आउटपुट।

निष्कर्ष: प्रोटीन केवल जीवित उत्पादों में निहित है, और उबले हुए उत्पादों में प्रोटीन नष्ट हो गया है, इसलिए उनके साथ कोई प्रतिक्रिया नहीं हो रही है। यदि उत्पादों को कुचल दिया जाता है, तो प्रतिक्रिया तेजी से गुजर जाएगी।